徐大勇/李峰团队在《BMC Microbiology》发表基于ERA/CRISPR-Cas12a技术的烟曲霉快速检测系统的开发与应用
徐大勇/李峰团队在《BMC Microbiology》发表基于ERA/CRISPR-Cas12a技术的烟曲霉快速检测系统的开发与应用
烟曲霉(Aspergillus fumigatus)是侵袭性曲霉病(IA)的主要致病菌,在免疫缺陷人群中具有较高的感染率和死亡率。传统的真菌培养与镜检虽然特异性强,但耗时长;分子诊断方法如PCR虽灵敏度高,但对设备和操作人员要求较高,限制了其在基层医疗机构的推广。因此,开发一种快速、准确、简便的烟曲霉检测方法具有重要的临床价值。
针对烟曲霉快速、准确检测这一难题,淮北师范大学科研人员在《BMC Microbiology》发表了题为“Development and application of a rapid detection system for Aspergillus fumigatus based on ERA/CRISPR-Cas12a”的研究论文(DOI: https://doi.org/10.1186/s12866-026-04881-4)。
本研究以烟曲霉特异性靶基因anxC4为检测对象,将酶促重组酶扩增(ERA)与CRISPR-Cas12a系统相结合,构建了一种新型快速检测平台。该平台在恒温37°C下完成反应,采用“管盖-管底分离”的One-Pot策略,将扩增与检测系统分别置于离心管盖和管底,有效避免了传统方法中常见的气溶胶污染问题。通过优化反应体系,荧光检测灵敏度达到1 fg/μL,试纸条检测灵敏度为10 fg/μL,与其它真菌无交叉反应。整个检测过程在60分钟内完成,结果可通过荧光信号或侧流试纸条直观判读。在62份临床痰液样本中,该方法的荧光检测灵敏度为93.75%,特异性为93.33%;试纸条检测灵敏度为90.63%,特异性为96.67%,与传统培养和qPCR结果高度一致(kappa = 0.87)。该研究为烟曲霉感染的早期快速诊断提供了新工具,也为其它病原真菌的即时检测提供了技术参考。
论文第一作者为淮北师范大学生命科学学院2023级微生物学硕士研究生蒋邱阳,通讯作者为徐大勇副教授和李峰教授,淮北师范大学为独立完成单位。研究得到了安徽高校自然科学研究重点项目、安徽高校创新团队项目等基金的支持。
论文链接:
https://doi.org/10.1186/s12866-026-04881-4
作者介绍:
徐大勇:https://sxxy.chnu.edu.cn/szdw/jsfc/content_127109
李 峰:https://sxxy.chnu.edu.cn/szdw/jsfc/content_48113
